RT-PCR及质粒载体构建技术服务-分子生物学服务 -技术服务-生物在线

产品名称： RT-PCR及质粒载体构建技术服务

英文名称： RT-PCR

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北京凯诺春天生物科技有限公司

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一、RT-PCR扩增目的基因：

1、提取目的细胞或组织的总RNA，并将其反转录成cDNA；

2、采用普通PCR扩增得到目的基因（对于片段较长或在细胞中表达量较低的基因，采用巢式PCR进行扩增）；

3、将目的基因克隆到T载体上，并进行测序鉴定（如客户需要克隆到其他载体上，需要提供载体，可直接将目的基因克隆到相应载体上）；

二、半定量RT-PCR（一般用于目的基因表达改变的检测）：

1、提取目的细胞或组织的总RNA，并将其反转录成cDNA；

2、采用普通PCR扩增内参（b-actin或GAPDH），调整扩增循环数，使其处于对数扩增期；调整内参，使其保持一致；

3、普通PCR扩增目的基因，并通过图像分析软件分析目的基因与内参表达量的比例；

4、统计分析；